Характеристика вуглеводних детермінант поверхні клітин мишиної лімфоми NK/Ly по зв'язуванню нативних лектинів із наступним їх виявленням непрямим імуноцитохімічним методом

М. М. Луцик, В. І. Ковалишин, А. М. Ященко

Охарактеризовано вуглеводні детермінанти поверхні клітин мишиної лімфоми NK/Ly з допомогою непрямого імуноцитохімічного методу виявлення зв'язування лектинів (Кон А, LcL, РNA, WGA) із застосуванням світлової і електронної мікроскопії. Префіксовані клітин обробляли нативними лектинами, після чого зв'язані лектини виявляли з допомогою отриманих специфічних антитіл (або пероксидази хрону для Кон А), мічених колоїдним золотом. Для візуалізації колоїдного золота при світлооптичній мікроскопії застосували метод фізичної проявки ацетатом срібла. Встановлено, що на поверхні клітин NK/Ly найбільш виражені вуглеводні детермінанти до WGA з високим спорідненням зв'язування, що свідчить про значний вміст сіалових кислот у складі гліканів N- і, особливо, О-типу. Лектин сочевиці виявляв найменшу кількість детермінант із низьким спорідненням зв'язування. Відносно високий вміст PNA+ клітин свідчить про десіалювання О-глікозильних ланцюгів і експонування T-F антигену. Обговорено переваги непрямого імунохімічного методу виявлення лектин-зв'язуючих сайтів у порівнянні з прямими методами, при яких застосовуються модифіковані міткоюі лектини.

скачати повний текст статті в форматі PDF